методика определения концентрации антител к
ацетилхолиновым рецепторам
Концентрация антител к ацетилхолиновым рецепторам определяется радиоиммунологическим методом с помощью коммерческой тест-системы (DLD Diagnostika GMBH, Германия). Образцы сыворотки крови хранятся при -20 °С. Непосредственно перед проведением анализа сыворотки размораживаются, отбираются аликвоты по 5 мкл и помещаются в пробирки. К пробам добавляется по 100 мкл 125 I-рецептора ацетилхолина (удельная активность - 342 Ci/ммоль), 50 мкл антител к иммуноглобулину G человека, перемешивается и инкубируется в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем добавляется по 1 мл промывочного буфера, центрифугируется в течение 20 мин при 3000 об/мин, надоса-дочная жидкость удаляется декантацией. Полученный осадок ресуспензируется и повторяется процедура промывки. Определяется радиоактивность проб и вычисляется концентрация антител, выражаемая в нмоль/л, по формуле:
С = (cpmi - cpmn)xDxF,
где С - концентрация антител, нмоль/л; D - фактор, учитывающий дату изготовления набора; F - фактор, учитывающий удельную активность метки; cpmi - радиоактивность пробы, имп/мин; cpmn - радиоактивность негативного контроля, имп/мин.
Повышенным титром антител к ацетилхолиновым рецепторам считается значение, превышающее 0,50 нмоль/л (рис. 10).
&hide_Cookie=yes)
Рис. 10. Титр антител к ацетилхолиновым рецепторам - норма (0) не более 0,50 нмоль/л. 1. Больные миастенией с ранним началом без тимомы. 2. Больные миастенией с поздним началом без тимомы. 3. Больные миастенией, сочетающейся с тимомой. 4. Пациенты с тимомой без признаков миастении. 5. Больные с миастеническим синдромом Ламберта-Итона. 6. Больные с конгенитальными миастеническими синдромами
методика определения уровня антител к титин-белку