Заключение препаратов под покровное стекло

ДЕГИДРАТАЦИЯ ПРЕПАРАТОВ

Препараты следует полностью дегидратировать перед тем, как поместить в ксилол для просветления.

Если препараты быстро проводятся через спирты, осветление в ксилоле, загрязненном водой, приводит к появлению микроскопических капель воды на поверхности препарата

(рис. 121).

Ксилол для просветления должен быть всегда свежий, примесь спирта и воды вызывает его помутнение. В этом случае реагент надо заменить.

Рис. 121. Недостаточная дегидратация среза перед его заключением. Микроскопические капли воды в заключенном срезе. Иммуногистохимическое выявление CD5, х600

ПРОСВЕТЛЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ

Недостаточная экспозиция в ксилоле или использование для осветления загрязненного ксилола приводит к недостаточному осветлению препаратов (рис. 122).

Ксилол для просветления должен быть всегда свежий, примесь спирта и воды вызывает его помутнение. В этом случае реагент надо заменить.

Рис. 122. Недостаточное просветление препарата. Эндоскопическая биопсия желудка. Иммуногистохимическое выявление CD20, х600

ВЫСЫХАНИЕ ПРЕПАРАТА

Покрытие препаратов покровными стеклами всегда следует осуществлять до того, как препарат успевает высохнуть.

Если препараты частично высыхают перед накрытием покровными стеклами, некоторые ядра клеток становятся черными или как бы обведенными темным контуром (рис. 123).

КРИСТАЛЛИЗАЦИЯ МОНТИРУЮЩЕЙ СРЕДЫ

Желательно использовать гистологическую среду высокого качества. Следует иметь в виду, что среды низкого качества при длительном хранении могут кристаллизоваться. Кристализованная гистологическая среда при длительном хранении может образовывать кристаллы и «поднимать» покровные стекла с образованием крупных пузырей (рис. 124).

Разведение монтирующей среды ксилолом, как правило, не дает требуемого результата. Через некоторое время среда под покровным стеклом все равно кристаллизуется, мутнеет (рис. 125).