ТЕМА 1. ДОИМПЛАНТАЦИОННАЯ ДИАГНОСТИКА
Доимплантационная диагностика появилась в 1990-х гг. благодаря быстрому развитию методов вспомогательной репродукции - экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и микрометодов, приемлемых для анализа генома единичных клеток, таких как методы молекулярной цитогенетики (различные варианты FISH) и молекулярной генетики (варианты ПЦР). В настоящее время список наследственных болезней в доимплантационной диагностике включает не только многие МБ (МВ, ФКУ), но и различные хромосомные болезни. Спектр заболеваний, доступных этому виду диагностики, в настоящее время насчитывает более 30 нозологий и включает все наиболее распространенные моногенные и хромосомные болезни.
Материалом для доимплантационной диагностики могут быть полярные тельца или отдельные бластомеры дробящейся яйцеклетки, полученные микрургическим путем от доимплантационных зародышей - продуктов ЭКО.
В зависимости от материала доимплантационную диагностику можно подразделить на преконцепционную (анализ полярных телец, рис. 13.1) и собственно доимплантационную (анализ бластомеров или клеток трофобласта).
&hide_Cookie=yes)
Рис. 13.1. Аспирация полярного тельца: 1 - вакуумная присоска; 2 - яйцеклетка; 3 - оболочка яйцеклетки; 4 - полярное тельце; 5 - шприц для аспирации полярного тельца
Одна из проблем, связанных с применением молекулярно-генетических методов, обусловлена особенностями диагностики единичной клетки. На результаты ПЦР могут повлиять различные факторы, в частности контаминация образца или условия проведения реакции. Проблема цитогенетического анализа полярных телец заключается в невозможности применения традиционных методов анализа метафазных хромосом. Поэтому для этих целей обычно используют метод гибридизации in situ с флуоресцеин-мечеными ДНК-зондами, специфичными к участкам отдельных хромосом (метод FISH). В последние годы разработаны и апробированы методы приготовления хромосом из полярных телец человека, пригодных для стандартного цитогенетического анализа.