2.1. ПРИГОТОВЛЕНИЕ ЦИТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ИЗ СЕРОЗНЫХ ЖИДКОСТЕЙ
Жидкость из плевральной или брюшной полости эвакуируют с помощью обычного троакара или иглы Дюффо либо получают во время операции. Лаваж серозной полости при торакоили лапаротомии проводится у больных, у которых отсутствует выпотная жидкость. Для выполнения смыва 400 мл стерильного раствора 0,9% натрия хлорида вводится в серозную полость. После орошения плевры или брюшины верхнего этажа и малого таза выдерживается 10-минутная экспозиция, после чего промывная жидкость аспирируется для морфологического исследования.
Эффективность цитологического исследования во многом зависит от правильной техники забора материала. Вся эвакуированная жидкость доставляется в лабораторию для обработки. При больших количествах эвакуированной жидкости для исследования направляется последняя порция в объеме не менее 1 л. Жидкость должна быть исследована несвернувшейся, для чего сразу же после взятия в нее должен быть добавлен 5% цитрат натрия в расчете 5 мл на 100 мл жидкости. Важно дать отстояться жидкости не менее 1 ч после взятия. Чем больше объем доставленной жидкости и выдержано время ее отстаивания, тем гуще осадок, из которого готовятся цитологические препараты, тем больше вероятность обнаружения опухолевых клеток, особенно при их небольшом количестве.
Одновременно с изучением физико-химических свойств жидкость центрифугируется в течение 5 мин при 2500-3000 оборотов в 1 мин. Геморрагическую жидкость и прозрачную серозную жидкость без осадка и каких-либо включений центрифугируют в большом количестве (по 6-8) центрифужных пробирок емкостью в 10 мл. Если серозная жидкость мутная с осадком, для центрифугирования берут не более 20 мл (2 центрифужные пробирки), так как клеточных элементов бывает много. Цитологическому исследованию подвергается осадок центрифугата, из которого готовятся мазки. При наличии включений в виде хлопьев и клочков их выбирают из осадка, как только осадок образуется, и из них готовят мазки или клеточные блоки. При геморрагическом характере жидкости с большим кровянистым осадком после центрифугирования отсасывается верхняя белесоватая пленка с поверхности осадка и тотчас переносится на предметное стекло, так как в верхнем слое осадка центрифугата геморрагической жидкости сосредотачиваются лейкоциты крови и другие клетки, в том числе и опухолевые, нижний слой центрифугата состоит из эритроцитов. Из собранного на предметном стекле осадка краем шлифованного стекла берется небольшая капля и переносится на другое предметное стекло. Мазок делается скольжением, без малейшего нажима во избежание травматизации клеток.
Мазки окрашиваются по методу Паппенгейма или Папаниколау. Важно соблюдение протокола окрашивания, так как плохое окрашивание (как недокрашивание, так и перекрашивание) затрудняет адекватную оценку мазка.