Результаты исследований позволили разработать судебно-медицинский (морфометрический) метод оценки следов крови, который дает возможность уточнить обстоятельства механической травмы. Судебно-медицинская оценка следов крови при механической травме проводится с позиции системного подхода исследования объектов. Разработанный метод включает этапность проведения исследовательских процедур.
1. На месте обнаружения трупа: детальное изучение повреждений и выявление следов крови на теле и одежде потерпевшего, нападавшего и предметах интерьера (обнаружение, предварительные пробы на кровь) (по данным исследований, проведенных ранее другими авторами) [174, 178].
Методика проведения исследования в ультрафиолетовых лучах. С участков, на которых обнаружены следы, похожие на кровь, делают соскоб (или вырезают кусочек ткани), затем помещают его на предметное стекло и обрабатывают 1–2 каплями концентрированной серной кислоты. Если исследуемое вещество является кровью, то происходит переход гемоглобина в гематопорфирин, и в ультрафиолетовых лучах наблюдается яркая оранжевая флюоресценция. Для усиления флюоресценции рекомендуется нанести на объект одну каплю 3% раствора перекиси водорода. Флюоресценцию наблюдают при разведении крови до 1:10 000 в водном растворе и до 1:2000 на тканях одежды. Попытки уничтожить кровь с помощью химических растворителей (этанол, эфир, бензин, ацетон), замыванием водой, стиркой с мылом, кипячением с содой, термическим воздействием (проглаживание горячим утюгом) снижают, но не уничтожают флюоресценцию.
Методика проведения пробы с перекисью водорода. Одну каплю 3% раствора перекиси водорода наносят на исследуемый след. Через несколько секунд перекись водорода начинает разлагаться с образованием воды и кислорода. Свободный кислород вспенивает каплю, что хорошо заметно при визуальном наблюдении за реакцией. Если каталаза частично разрушилась, реакцию можно наблюдать с помощью лупы. Взаимодействие крови с перекисью водорода не препятствует дальнейшему судебно-медицинскому исследованию. Перекись водорода быстро разлагается на свету, поэтому ее хранят в емкости из темного стекла и перед использованием проверяют на активность.
Методика проведения реакции с бензидином. Нити исследуемой ткани или соскоб крови помещают на фильтровальную бумагу. К ним добавляют 1–2 капли 1% спиртового раствора основного бензидина и 1–2 капли 3% раствора перекиси водорода и наблюдают за образцами. Если спустя 15–20 с бумага вокруг образцов синеет, то в них может присутствовать кровь. При наличии большого количества следов ватный тампон смачивают смесью реактивов и прикладывают его к краю исследуемого пятна. Реакция считается положительной, если на обработанном реактивом участке ватного тампона появляется синяя окраска. Необходимо помнить, что формальдегид (Формалин♠), сернистая медь, соли йода дают с раствором основного бензидина подобную реакцию. Для определения наличия крови можно использовать реактив В.И. Воскобойникова, который состоит из одной весовой части основного, уксуснокислого или солянокислого бензидина, десяти весовых частей лимонной или винной кислоты и пяти весовых частей перекиси бария. Все компоненты этого состава тщательно перемешивают и хранят в герметически закрытой посуде из темного стекла. При необходимости небольшое количество реактива растворяют в 2–3 мл кипяченой воды и используют для проведения предварительной пробы на наличие крови.
Методика проведения пробы с реактивом В.И. Воскобойникова. Приготовленный реактив при помощи пульверизатора наносят на исследуемый объект. Реактив готовят из трех компонентов: раствора бензидина в уксусной кислоте, раствора коллодиума в этиловом эфире и 3% раствора перекиси водорода. Раствор I: к 1 г бензидина добавляют 10 мл ледяной уксусной кислоты; раствор II: 25% раствор коллодиума в этиловом эфире. Названные компоненты смешивают в следующих пропорциях: раствор бензидина в уксусной кислоте — 1 мл; раствор коллодиума в этиловом эфире — 20 мл, перекиси водорода 3% — 0,5 мл. Перед применением реактив тщательно перемешивают. Цвет следов в результате реакции бензидина с кровью в присутствии перекиси водорода становится темно-синим, а раствор коллодиума в реактиве снижает подвижность красителя, образующегося в результате цветной реакции, и тем самым обеспечивает сохранность физических особенностей следов. Во избежание последующего обесцвечивания следы до проведения пробы необходимо зарисовывать или фотографировать по правилам судебной медицины. В случаях, когда особенности объекта-носителя (цвет, текстура и т.п.) не позволяют применить указанную методику, авторы предложили способ цветных оттисков, который основан на способности фотобумаги воспринимать красящий компонент пятна (гемоглобин).
Методика проведения исследования способом цветных оттисков. Лист фотобумаги фиксируют в недубящем фиксажном растворе, промывают, вымачивают в течение 5–10 мин в смеси: раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте — 1:10 мл; 5–10% раствора коллодиума в этиловом эфире в соотношении, составляющем 1:20. Участок ткани с предполагаемыми следами крови орошают при помощи пульверизатора 3% перекисью водорода и накладывают на него светочувствительной стороной предварительно подготовленный влажный лист фотобумаги, поместив все между листами микропористой резины, и незначительно прижимают на 5–10 мин, после чего фотобумагу извлекают. На участке, контактировавшем со следами крови, образуется относительно стойкий выраженный синий цвет, зеркальный (негативный) отпечаток. Полученное изображение (след) будет соответствовать подлинному следу крови, его рекомендуется защитить при помощи бесцветной липкой ленты (скотча) от обесцвечивания под действием кислорода воздуха и солнечных лучей.
Методика О-толуидинового теста. Подготовка раствора: к 40 мл абсолютного этилового спирта добавляют 1,6 г о-толуидина, затем 30 мл ледяной уксусной кислоты и 30 мл дистиллированной воды. Полученный раствор хранят до применения в холодильнике. Берут 1–2 капли полученного раствора и наносят на тампон или лист фильтровальной бумаги, содержащие следы крови и контроль, и добавляют 1–2 капли 3% перекиси водорода. Окрашивание в темно-синий цвет указывает на положительный результат теста.