У каждого больного при поступлении в хирургическое, акушерское, гинекологическое, травматологическое и другое отделение, помимо прочей информации, собирают трансфузиологический анамнез. Фиксируют все прошлые гемотрансфузии и связанные с ними осложнения, иммуноконфликтные беременности, наличие в крови антиэритроцитных антител.
Далее каждому больному проводят первичное определение группы крови по системе АВ0 и резус-принадлежности по антигену D с помощью моноклональных сывороток анти-А, анти-В, анти-D-супер. Определение группы крови перекрестным методом с помощью стандартных гемагглютинирующих сывороток в настоящее время практически не применяется. Использование моноклональных технологий надежнее, быстрее и эффективнее. Суть моноклональных методик состоит в образовании агглютинации (сгустков) в капле на плоскости при наличии у больного определяемого антигена. Кровь берется из кубитальной вены в стандартную пробирку, осадок эритроцитов образуется отстаиванием или центрифугированием. В качестве диагностикумов используются цоликлоны, которые представляют собой синтетические заменители сывороток. Цоликлоны анти-А и анти-В содержат искусственные заменители агглютининов α и β, их называют эритротестами. Внешне диагностикумы различаются. Цоликлон анти-А имеет розовую окраску и розовую крышку флакона. Цоликлон анти-В имеет синюю маркировку и синий цвет самого раствора. Цоликлон анти-АВ имеет желтую маркировку (рис. 8.1).
Рис. 8.1. Условия проведения иммуногематологических исследований
Техника определения группы крови по системе АВ0
- На промаркированный планшет в 2 точки наносят по 2 большие капли (0,1 мл) цоликлонов анти-А и анти-В, рядом — по 1 маленькой капле (0,01–0,02 мл, то есть в 10 раз меньшей) осадка эритроцитов.
- Сыворотки и эритроциты перемешивают.
- Экспозиция продолжается 3 мин, после чего оценивают результат исследования (табл. 8.1).
- Для снятия возможной неспецифической агрегации эритроцитов добавляют по 2 капли изотонического раствора натрия хлорида и повторно оценивают результат.
Таблица 8.1. Определение группы крови с помощью моноклональных антител (+ наличие агглютинации, 0 — отсутствие агглютинации)
Результат реакции с цоликлоном | Результат определения |
Анти-А | Анти-В | Анти-АВ |
0 | 0 | 0 | 0(І) |
+ | 0 | + | А(ІІ) |
0 | + | + | В(ІІІ) |
+ | + | + | АВ(ІV) |
Принципы оценки результатов определения группы крови по системе АВ0 (см. табл. 8.1):
1) если реакция агглютинации наступила только с цоликлоном анти-А, то исследуемая кровь относится к группе А(II);
2) если реакция агглютинации наступила только с цоликлоном анти-В, то исследуемая кровь относится к группе В(III);
3) если реакции агглютинации не наступила с цоликлонами анти-А и с анти-В, то кровь относится к группе 0(I);
4) если реакция агглютинации наступила с цоликлонами анти-А и анти-В и ее нет в контрольной капле с изотоническим раствором, то кровь относится к группе АВ(IV).
Техника определения резус-принадлежности по антигену D моноклональными сыворотками анти-D-супер:
- На промаркированный планшет наносят 2 капли (0,1 мл) реагента анти-D-супер, рядом — 1 каплю (0,01–0,02 мл) осадка эритроцитов.
- Сыворотку и эритроциты перемешивают.
- Экспозиция продолжается 3 мин. При наличии агглютинации исследуемая кровь маркируется как резус-положительная, при отсутствии — как резус-отрицательная (рис. 8.2).
Рис. 8.2. Оценка результатов определения резус-принадлежности
Все прочие лабораторные исследования (подтверждающие анализы на группу крови и резус-принадлежность по антигену D, фенотип по антигенам С, с, Е, е, наличие антигена К, антитела к эритроцитарным антигенам и т.д.) выполняются в клинической лаборатории ЛПУ из пробирок-спутников соответствующего образца (обычно с фиолетовой крышкой) (рис. 8.3). В настоящее время во всех крупных ЛПУ и УСК все лабораторные исследования проводят на современных анализаторах крови. Полученные данные, обязательно распечатанные на бумажном носителе, вклеиваются в историю болезни, группа крови и резус-принадлежность по D отражаются на ее титульном листе.
Проведение процедур гемотрансфузии требует знаний, умений, опыта, ответственности исполнителя. Любая гемотрансфузия — это прерогатива врача, прошедшего специализацию по клинической трансфузиологии или иммуногематологии (36 ч). Переливание компонентов крови — целый ритуал, выполнять который следует, строго соблюдая ряд законодательных правил (Приказ Минздрава России от 12 ноября 2020 г. № 1134н). Правила гемотрансфузий действуют всегда, независимо от условий проведения процедуры.
Рис. 8.3. Процесс повторного исследования образцов крови больных на групповую и резус-принадлежность в клинической лаборатории
Правила гемотрансфузий
Действия врача при переливании эритроцитсодержащих сред:
- провести макроскопический осмотр контейнера с кровью (эритромассой, эритроцитной взвесью), оценить цвет гемокомпонента (отсутствие гемолиза), наличие/отсутствие посторонних включений, проверить герметичность упаковки, правильность паспортизации, срок годности гемокомпонента;
- сопоставить все данные по изоиммунологии, приводимые на этикетке гемокомпонента, с данными, приводимыми в истории болезни;
- определить группу крови донора и реципиента по системе АВ0, выполнить пробу на индивидуальную совместимость образца крови реципиента с эритроцитами донора на плоскости при комнатной температуре;
- подогреть гемотрансфузионную среду до 37 °С;
- выполнить биологическую пробу;
- контролировать процесс гемотрансфузии и не менее 2 ч посттрансфузионного периода;
- зарегистрировать трансфузию в журнале регистрации переливаний крови, оформить протокол переливания и поместить его в историю болезни;
- сохранять остатки гемотрансфузионной среды в течение 48 ч в холодильнике при низкой плюсовой температуре.