8.1. Меры безопасности при работе с материалами для микробиологической диагностики
Микробиологическую диагностику проводят в целях установления вида патогена, выбора антимикробных средств, определения источника и путей распространения инфекции (эпидемиологическое маркирование). Необходимость ее проведения возникает при обнаружении в полости рта признаков инфекционных заболеваний, которые возникают вследствие роста и развития в пораженных тканях патогенов. В перечне наиболее распространенных заболеваний — стоматиты, гингивиты, глосситы и фарингиты. В полости рта могут находиться и очаги венерических инфекций (гонореи, сифилиса), а также возбудители хламидиоза, вирусы папилломы человека, ВИЧ, цитомегаловирус. Кроме этого, у пациента стоматологического кабинета могут быть грипп, ОРВИ, COVID-19, туберкулез и любая другая контагиозная инфекция, о наличии которой он может не подозревать.
Следовательно, работая с пациентом, всегда необходимо учитывать, что тот способен быть источником инфекции, а в полости рта могут находиться ее очаги. Это означает, что при любых контактах с пациентом и материалом, извлекаемым из очагов поражения, необходимо принимать меры предосторожности, исключающие возможность дальнейшего распространения инфекции.
Собственно диагностике предшествуют сбор материала и его транспортировка в лабораторию — преаналитический этап.
При стоматологических заболеваниях бактериологическими методами исследуют зубную бляшку, ротовую жидкость, содержимое десневого желобка или патологического десневого кармана, материал из кариозной полости, материал из корневых каналов, гранулемы, гнойное отделяемое, пунктаты, соскобы, мазки-отпечатки со слизистой оболочки или элементов поражения (в практической стоматологии чаще исследуют мазки-отпечатки со слизистой оболочки, гнойное отделяемое и пунктаты).
Перед забором материала необходимо выяснить у больного, не принимал ли он в течение последних 3 нед антибиотики. При заборе нельзя обрабатывать полость рта бактерицидными препаратами. Также следует исключить попадание в пробу слюны, для чего исследуемую область обкладывают стерильными ватными тампонами, важно также сократить до минимума время контакта пробы с воздухом.
Для сбора проб используют стерильные шпатели, гладилки, ватные тампоны, резиновые столбики, приготовленные из ластиковой резинки, обезжиренное стекло с зашлифованными краями и шприцы с пункционными иглами.
Забор материала со слизистых оболочек и поверхности языка проводят стерильным ватным тампоном с площади 1 см2. Пробу можно получить соскобом шпателем или гладилкой. Перед взятием материала из эрозий и язв поверхностный налет удаляют сухим или смоченным изотоническим раствором тампоном. В некоторых случаях можно делать мазки-отпечатки, для чего сухое стекло прикладывают несколько раз к исследуемому участку. В случае труднодоступных мест для забора материала используют резиновые столбики, которые прикладывают сначала к пораженному участку, а затем к стеклу.
При взятии и транспортировке материала для проведения микробиологического исследования необходимо соблюдать ряд общих правил.
- Брать материал следует во время наибольшего содержания в нем возбудителей заболевания (до начала антибактериальной терапии или не менее чем через 10–12 ч после отмены препарата), непосредственно из очага инфекции, либо забирая соответствующее отделяемое (гной из фистулы, отделяемое пародонтального кармана и пр.). При этом во избежание загрязнения пробы микрофлорой среды необходимо соблюдать строгую асептику. Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования.
- Материал для выделения аэробов и факультативных анаэробов берут стерильными ватными тампонами (отделяемое из раны, мазки со слизистых оболочек, зева), шприцем (кровь, гной, экссудат), непосредственно в стерильную посуду. Материал для выделения строгих анаэробов получают из патологического очага путем пункции шприцем, из которого предварительно удаляют воздух. При исследовании тканей их фрагменты берут из глубины очага и сразу погружают в транспортную среду вместе с тампонами. Анаэробные микроорганизмы обладают чувствительностью к довольно узкому спектру антибактериальных препаратов, поэтому целесообразно проводить лекарственную терапию после определения чувствительности к антибиотикам.
- Транспортировку образца в лабораторию следует производить в максимально короткие сроки. По умолчанию исследование должно начаться не позднее чем через 2 ч после взятия биопробы. При отсутствии такой возможности пробу следует сохранять в транспортной среде. Осуществив забор материала, после внесения тупфера в транспортную среду пробирку можно хранить 12–48 ч (в зависимости от состава среды) при комнатной температуре (+18–22 °С). Пробы нельзя хранить в холодильнике. Образцы для культивирования строгих анаэробов транспортируют в специальных флаконах, заполненных газом, не содержащим кислорода. Во флакон пробу вносят уколом иглы через плотно завальцованную резиновую крышку. Материал можно транспортировать прямо в шприце, на кончик которого надета стерильная пробка. Часто для транспортировки и хранения анаэробов исследуемый материал моментально помещают в специальную транспортную среду (тиогликолевую, среду Стюарта). Для обеспечения сохранности пробы также используют специальные транспортные среды, биксы (стерилизационные контейнеры), пеналы и т.д.
- К клиническому образцу, направляемому в лабораторию, прилагают сопроводительный документ, содержащий основные сведения, необходимые для проведения микробиологического исследования (характер материала, фамилия, имя и отчество больного, название учреждения или отделения, предполагаемый диагноз, предшествующая антимикробная терапия, дата и время взятия материала, фамилия специалиста, направляющего материал на исследование).