Глава 6. Общие подходы к исследованию гемостаза
О.В. Сомонова
Система гемостаза выполняет две основные функции: поддержание крови в жидком состоянии и защиту организма от кровотечения при повреждении целостности сосудистой стенки. Сохранение общей активности гемостаза в физиологических пределах можно определить как поддержание гемостатического баланса. Этот баланс имеет высокий запас прочности, но при смещении баланса за рамки физиологических норм возникают условия для развития патологических кровотечений или тромбозов.
Тесты, применяемые для исследования системы гемостаза, должны быть информативными, то есть обладать высокой чувствительностью по выявлению патологии и достаточной специфичностью.
Современная гемостазиология использует весь спектр возможностей, которые представляют прогресс в области лабораторных технологий, сохраняя в то же время и традиционные методы. Разные технологические подходы дают возможность с разной специфичностью и чувствительностью оценить одни и те же компоненты системы гемостаза, а набор методов зависит от возможностей лаборатории.
Микроскопия (световая, фазово-контрастная, электронная) — используется для выявления измененных форм эритроцитов (фрагментация при синдроме ДВС), гигантских тромбоцитов, для оценки морфофункциональной тромбоцитарной активности.
Клоттинговый метод — определение времени образования сгустка in vitro с разными способами детекции, применяется при первичной диагностике нарушений свертывания, в основном недостаточности, а также для оценки активности отдельных факторов, мониторинга антикоагулянтной терапии. Клоттинговый метод — основной в оценке плазменного звена гемостаза.
Фотооптический, лазерный турбидиметрический и нефелометрический методы применяются для диагностики нарушений первичного гемостаза, оценки функциональной активности тромбоцитов, индуцированной агрегации.
Амидолитический метод с хромогенными субстратами используется для выявления недостаточности или гиперпродукции отдельных факторов свертывания и антикоагулянтов.
Иммунологический метод с использованием моноклональных антител, твердофазного иммуноферментного анализа (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay — ELISA), проточной цитометрии применяется для оценки предтромботических состояний эндотелиального повреждения, микровезикуляции.
Молекулярно-генетический, полимеразная цепная реакция (ПЦР) — диагностика с рестрикционным анализом применяется для выявления мутаций и полиморфизмов генов при диагностике предрасположенности к тромбозам, при исследовании генетических дефектов, приводящих к кровоточивости, прогнозировании индивидуальной чувствительности к антитромботическим средствам.
Биохимические исследования используются для определения некоторых компонентов свертывания или веществ, активно влияющих на состояние сосудов и тромбообразование [например, гомоцистеин (ГЦ)].
Методы point-of-care применяются для мониторинга антитромботической терапии и гепаринизации в ходе искусственного кровообращения и при чрескожных вмешательствах на коронарных артериях, а также для измерения активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ), международного нормализованного отношения (МНО), активированного времени свертывания как реакции на антитромботическую терапию.